(Flow цитометрия , FCM ) — боялған жасуша маркерлерінің флуоресценция қарқындылығын өлшейтін жасуша анализаторы. Бұл жалғыз ұяшықтарды талдау және сұрыптау негізінде жасалған жоғары технологиялық технология. Ол жасушалардың көлемін, ішкі құрылымын, ДНҚ, РНҚ, белоктар, антигендер және басқа да физикалық немесе химиялық қасиеттерін жылдам өлшеп, жіктей алады және осы жіктеулерді жинауға негізделуі мүмкін.
Ағын цитометрі негізінен келесі бес бөліктен тұрады:
1 Ағындық камера және сұйықтық жүйесі
2 Лазерлік жарық көзі және сәулені пішіндеу жүйесі
3 Оптикалық жүйе
4 Электроника, сақтау, көрсету және талдау жүйесі
5 Жасушаларды сұрыптау жүйесі
Олардың ішінде лазерлік жарық көзіндегі және сәулені қалыптастыру жүйесіндегі лазерлік қозу ағынды цитометриядағы флуоресценциялық сигналдардың негізгі өлшемі болып табылады. Қоздыру жарығының қарқындылығы мен экспозиция уақыты флуоресценция сигналының қарқындылығына байланысты. Лазер - бір толқынды, жоғары қарқынды және тұрақты жарықтандыруды қамтамасыз ете алатын когерентті жарық көзі. Бұл осы талаптарды қанағаттандыру үшін тамаша қоздырғыш жарық көзі болып табылады.
Лазер көзі мен ағын камерасы арасында екі цилиндрлік линзалар бар. Бұл линзалар лазер көзінен шығарылатын дөңгелек көлденең қимасы бар лазер сәулесін көлденең қимасы кішірек (22 мкм × 66 мкм) эллиптикалық сәулеге бағыттайды. Бұл эллиптикалық сәуленің ішіндегі лазер энергиясы лазерді анықтау аймағынан өтетін жасушалар үшін тұрақты жарық қарқындылығын қамтамасыз ететін қалыпты таралуға сәйкес бөлінеді. Екінші жағынан, оптикалық жүйе линзалардың, саңылаулардың және сүзгілердің бірнеше жиынтығынан тұрады, оларды шамамен екі топқа бөлуге болады: ағын камерасының жоғары және төменгі ағыны.
Ағынды камераның алдындағы оптикалық жүйе линза мен түйреуіш тесігінен тұрады. Объектив пен түйреуіш тесігінің негізгі қызметі (әдетте екі линза және түйреуіш тесігі) лазер көзі шығаратын дөңгелек көлденең қимасы бар лазер сәулесін көлденең қимасы кішірек эллиптикалық сәулеге бағыттау болып табылады. Бұл лазер энергиясын қалыпты таралуға сәйкес таратады, лазерді анықтау аймағындағы ұяшықтар үшін дәйекті жарықтандыру қарқындылығын қамтамасыз етеді және адасқан жарықтың кедергісін азайтады.
Сүзгілердің үш негізгі түрі бар:
1: Ұзын өту сүзгісі (LPF) - тек белгілі бір мәннен жоғары толқын ұзындығы бар жарықтың өтуіне мүмкіндік береді.
2: Қысқа өту сүзгісі (SPF) - толқын ұзындығы белгілі бір мәннен төмен жарықтың өтуіне ғана мүмкіндік береді.
3: өткізу жолағы сүзгісі (BPF) - тек белгілі бір толқын ұзындығы диапазонындағы жарықтың өтуіне мүмкіндік береді.
Сүзгілердің әртүрлі комбинациялары әртүрлі толқын ұзындығындағы флуоресценция сигналдарын жеке фотокөбейткіш түтіктерге (PMTs) бағыттай алады. Мысалы, PMT алдындағы жасыл флуоресценцияны (FITC) анықтауға арналған сүзгілер LPF550 және BPF525 болып табылады. PMT алдындағы қызғылт-қызыл флуоресценцияны (PE) анықтау үшін қолданылатын сүзгілер LPF600 және BPF575 болып табылады. PMT алдындағы қызыл флуоресценцияны (CY5) анықтауға арналған сүзгілер LPF650 және BPF675 болып табылады.
Ағындық цитометрия негізінен жасушаларды сұрыптау үшін қолданылады. Компьютерлік технологияның дамуымен, иммунологияның дамуымен және моноклональды антиденелер технологиясының өнертабысы, оның биологияда, медицинада, фармацияда және басқа салаларда қолданылуы барған сайын кең таралуда. Бұл қолданбаларға жасуша динамикасын талдау, жасуша апоптозы, жасушаны типтеу, ісік диагностикасы, дәрілік заттардың тиімділігін талдау және т.б.
Жіберу уақыты: 21 қыркүйек 2023 ж
